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補體H因子(人)ELISA試劑盒

簡要描述:

貨號:WTA1048 產品名稱:補體H因子(人)ELISA試劑盒 Complement factor H, Human, ELISA kit 規格:48T/96T 品牌:進口原裝/國產

更新時間:2019-08-22 17:23:29

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貨號:WTA1048    產品名稱:補體H因子(人)ELISA試劑盒    Complement factor H, Human, ELISA kit    規格:48T/96T    品牌:進口原裝/國產

上海蔚霆生物科技有限公司長期提供各種種屬、各種系列Elisa試劑盒,價格實惠,質量有保證,信譽。歡迎來電索取各ELISA試劑盒產品說明書。凡購買目錄本公司ELISA檢測試劑盒可免費提供代測服務。進口原裝試劑盒需要兩到三周貨期,如需訂購,請點擊左上角的QQ、微信(815983355)進行咨詢,我們會盡快跟您聯系!

ELISA試劑盒說明

1.試劑盒保存:-20(較長時間不用時);2-8(頻繁使用時)。

2.濃洗滌液低溫保存會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。

3.中、英文說明書可能會有不一致之處,請以英文說明書為準。

4.剛開啟的酶聯板孔中可能會含有少許水樣物質,此為正常現象,不會對實驗結果造成任何影響。

Elisa試劑盒實驗原理

用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗LEP抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗LEP抗體、HRP標記的親和素,經過徹底洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的LEP呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。

ELISA試劑盒組成及試劑配制

1. 酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔)。

2. 標準品(Standard):2瓶(凍干品)。

3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。

4. 生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。

5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。

6. 生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1100

7. 辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1100

8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。

9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

Elisa試劑盒操作步驟

實驗開始前,請提前配置好所有試劑,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。

1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37反應120分鐘。

為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制),37,60分鐘。

3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。

4. 每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液) 100μl3760分鐘。

5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。

6. 依序每孔加底物溶液90μl37避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內進行檢測。

 

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