豬Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA試劑盒說明書

 

 

  注意：本公司所銷售試劑， 豬Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA試劑盒說明書 僅用于科研實(shí)驗(yàn)，不可用于食品或者臨床，食用藥品等等。

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ELISA 試劑盒所需要樣本處理及要求： :

1. 血清：室溫血液自然凝固 10-20 分鐘，離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇 EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合 10-20 分鐘后，離心 20 分鐘左右  （ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）去除顆粒。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。

3. 尿液：用無菌管收集，離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用 PBS （ PH7.2-7.4 ）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到 100 萬 /ml 左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）。仔細(xì)收集上清   。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的 PBS ， PH7.4 。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持 2-8 ℃ 的溫度。加入一定量的 PBS （ PH7.4 ），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于 -20 ℃ 保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融 .

7. 不能檢測含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（ HRP ）活性。

Elisa 試劑盒使用注意事項(xiàng)：

1. Elisa 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2 ．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。

3 ．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時間 zui 好 控制在 5 分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4 ．請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線， zui 好 做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本 OD 值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔 OD 值的），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（ n 倍）后再測定，計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)（ × n × 5 ）。

5 ．嚴(yán)格按說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn) .

6 ．本試劑不同批號組分不得混用。

7 ．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

8 ．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9 ．底物請避光保存。

Elisa 試劑盒安全性：

1 ． 避免直接接觸終止液和底物。如不小心接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。

2 ． 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

3 ． 不要用嘴接觸試劑盒里的任何成份。

4   Elisa 試劑盒請遠(yuǎn)離兒童

自備物品：

1 、 37 ℃ 恒溫箱

2 、 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀

3 、 精密移液器及一次性吸頭

4 、 蒸餾水

5 、 一次性試管

6 、 吸水紙

保存條件及有效期：

1 ．試劑盒保存：； 2-8 ℃ 。

2 ．有效期： 6 個月

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