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大鼠雌三醇(E3)ELISA試劑盒說明書

簡要描述:

貨號(hào):WTA5851,產(chǎn)品名稱:大鼠雌三醇(E3)ELISA試劑盒說明書,上海蔚霆生物科技專業(yè)供應(yīng)中檢所標(biāo)準(zhǔn)品,中檢所對(duì)照品,sigma試劑,生物試劑,科研抗體,生物耗材等。品種多,質(zhì)量好,靈敏度高,價(jià)格實(shí)惠,并且還提供免費(fèi)代檢測(cè)服務(wù)。我們真誠歡迎各界朋友光臨,并期待與您的合作!

更新時(shí)間:2019-08-22 17:23:29

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ELISA 結(jié)果判定常用的幾種方法

 

    1) 目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于 ( 競爭法則淺于 ) 陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。

 

    2) 以樣品孔的 OD 值大于陰性對(duì)照 OD +2 3SD ,作為陽性結(jié)果的閾值。

 

    3) P N ( 陽性孔 OD 值/陰性孔 OD ) 大于或等于 2 1 為陽性; P N 值小于 2 1 ,但大于 1 5 為可疑; P N 小于 1 5 為陰性。

 

4) 定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。

 

樣本處理及要求:

 

1. 血清:室溫血液自然凝固 10-20 分鐘,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。

 

2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇 EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合 10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。

 

3. 尿液:用無菌管收集,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

 

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用 PBS PH7.2-7.4 )稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到 100 /ml 左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

 

5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的 PBS PH7.4 。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持 2-8℃ 的溫度。加入一定量的 PBS PH7.4 ),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。

 

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于 -20℃ 保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融 .

 

7. 不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的( HRP )活性。

 

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