大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒說明書

貨號：WTA5843，產品名稱：大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒說明書，英文名稱：Rat soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand,sRANKL ELISA Kit，品牌：進口原裝/國產
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(本公司 大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒說明書 僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗，否則所產生的一切后果，由實驗者承擔，本公司概不負責.)

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1 ． 檢測原理 ：采用雙抗體夾心 ABC-ELISA 法

2 ．中、英文說明書可能會有不一致之處，請以英文說明書為準。

3 ．剛開啟的酶聯板孔中可能會含有少許水樣物質，此為正常現象，不會對實驗結果造成任何影響。

4 ．試劑盒保存： -20 ℃ （較長時間不用時）； 2-8 ℃ （頻繁使用時）。

5 ．濃洗滌液低溫保存會有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶。

該 Elisa 試劑盒 可檢測樣本：血液標本，組織液標本，尿液標本，糞便標本，腦脊液標本，胸腹水標本等（具體詳細情況請咨詢）

Elisa 試劑盒操作步驟 （具體操作以說明書為準）：

實驗開始前，請提前配置好所有試劑，試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時，用樣品稀釋液進行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。

1. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液 100 μ l ，余孔分別加標準品或待測樣品 100 μ l ，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜， 37 ℃ 反應 120 分鐘。

為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2. 棄去液體 ，甩干，不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100 μ l （取 1 μ l 生物素標記抗體加 99 μ l 生物素標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制）， 37 ℃ ,60 分鐘。

3. 溫育 60 分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板 3 次，每次浸泡 1-2 分鐘， 350 μ l/ 每孔，甩干。

4. 每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液（同生物素標記抗體工作液） 100 μ l ， 37 ℃ ， 60 分鐘。

5. 溫育 60 分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板 5 次，每次浸泡 1-2 分鐘， 350 μ l/ 每孔，甩干。

6. 依序每孔加底物溶液 90 μ l ， 37 ℃ 避光顯色（ 30 分鐘內，此時肉眼可見標準品的前 3-4 孔有明顯的梯度藍色，后 3-4 孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液 50 μ l ，終止反應（此時藍色立轉黃色）。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8. 用酶聯儀在 450nm 波長依序測量各孔的光密度（ OD 值）。 在加終止液后 15 分鐘以內進行檢測。

注：

1. 用戶在初次使用試劑盒時，應將各種試劑管離心數分鐘，以便試劑集中到管底。

2. 每次實驗留一孔作為空白調零孔，該孔不加任何試劑，只是最后加底物溶液及 2N H2SO4 。測量時先用此孔調 OD 值至零。

3. 為防止樣品蒸發，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜。

4. 未使用完的酶標板或者試劑，請于 2-8 ℃ 保存。標準品、生物素標記抗體工作液、辣根過氧化物酶標記親和素工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的標準品、生物素標記抗體工作液或、辣根過氧化物酶標記親和素工作液。

5. 建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。

Elisa 試劑盒檢測范圍（請 來 dian 咨詢索取）

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