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小鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒sigma代理

簡要描述:

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更新時間:2019-08-22 17:23:29

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ELISA 結果判定常用的幾種方法

 

    1) 目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于 ( 競爭法則淺于 ) 陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

 

    2) 以樣品孔的 OD 值大于陰性對照 OD +2 3SD ,作為陽性結果的閾值。

 

    3) P N ( 陽性孔 OD 值/陰性孔 OD ) 大于或等于 2 1 為陽性; P N 值小于 2 1 ,但大于 1 5 為可疑; P N 小于 1 5 為陰性。

 

4) 定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

 

樣本處理及要求:

 

1. 血清:室溫血液自然凝固 10-20 分鐘,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 / 分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。

 

2. 血漿:應根據標本的要求選擇 EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合 10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 / 分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。

 

3. 尿液:用無菌管收集,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 / 分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

 

4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 / 分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用 PBS PH7.2-7.4 )稀釋細胞懸液,細胞濃度達到 100 /ml 左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 / 分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

 

5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的 PBS , PH7.4 。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持 2-8℃ 的溫度。加入一定量的 PBS PH7.4 ),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 / 分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

 

6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于 -20℃ 保存,但應避免反復凍融 .

 

7. 不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的( HRP )活性。

 

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