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人膽固醇(CH)ELISA試劑盒說明書

簡要描述:

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更新時間:2019-08-22 17:23:29

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注意:本公司所銷售 人膽固醇(CH)ELISA試劑盒說明書 ,僅用于科研實驗,不可用于食品或者臨床,食用藥品等等

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ELISA 試劑盒操作注意事項

1.   試劑盒保存在 2-8 ,使用前室溫平衡 20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正常現象,水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。

2.   實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。

3.   標準品稀釋液即可視為陰性對照或者空白;預處理后的樣本無需稀釋,直接取 10 μ L 加樣即可。

4.   嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

5.   所有液體組分使用前充分搖勻。

試劑的準備

 20 × 洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按 1 20 稀釋,即 1 份的 20 × 洗滌緩沖液加 19 份的蒸餾水。

洗板方法

1.   手工洗板:甩盡孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置 1min 后甩盡孔內液體,在吸水紙上拍干,如此洗板 5 次。

2.   自動洗板機:每孔注入洗液 350 μ L ,浸泡 1min ,洗板 5 次。

操作步驟

1.   從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回 4

2.   設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品 50 μ L

3.   待測樣本孔先加待測樣本 10 μ L ,再加樣本稀釋液 40 μ L

4.   隨后標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶( HRP )標記的檢測抗體 100 μ L ,用封板膜封住反應孔, 37 水浴鍋或恒溫箱溫育 60min

5.   棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置 1min ,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板 5 次(也可用洗板機洗板)。

6.   每孔加入底物 A B 50 μ L 37 避光孵育 15min

7.   每孔加入終止液 50 μ L 15min 內,在 450nm 波長處測定各孔的 OD 值。

結果判斷

  繪制標準曲線:在 Excel 工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應 OD 值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。

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