培養基是供微生物生長、繁殖、代謝的混合養料。由于微生物具有不同的營養類型,對營養物質的要求也各不相同,加之研究的目的不同,所以種類很多,使用的原料也各有差異,但從營養角度分析,一般含有微生物所需的碳源、氮源、無機鹽、生長素以及水分等。另外,還應具有適宜的pH值、一定的緩沖能力、一定的氧化還原電位及合適的滲透壓。為了達到特定要求的研究,需要進行配制和滅菌,那么該如何配制與滅菌呢?
可按處方配制,也可使用按處方生產的符合規定的脫水培養基。
在制備時,應選擇質量符合要求的或單獨配方組分進行配制。應附有處方和使用說明,配制時應按使用說明上的要求操作以確保質量符合要求,不得使用結塊或顏色發生改變的。應在適當的條件下儲存,如低溫、干燥和避光,所有的容器應密封,尤其是盛放的容器。商品化的除了應附有處方和使用說明外,還應注明有效期、貯存條件、適用性檢查試驗的質控菌和用途。
為保證質量的穩定可靠,各培養基或各配方組分應準確稱量,配制常用的溶劑是純化水,特殊情況下,可能需要用去離子水和蒸餾水。應記錄各稱量物的重量和水的使用量。配制所用容器和配套器具應潔凈,可用純化水沖洗玻璃器皿以消除清潔劑和外來物質的殘留。
若采用不適當的加熱和滅菌條件,有可能引起顏色變化、透明度降低、瓊脂凝固力或pH的改變。因此,應采用驗證的滅菌程序滅菌,滅菌方法和條件,應通過無菌性試驗和促生長試驗進行驗證。此外,對高壓滅菌器的蒸汽循環系統也要加以驗證,以保證在一定裝載方式下的正常熱分布。應根據產品的特性,進行滅菌程序驗證。
細胞培養技術的進步已導致重組蛋白產品生產的大幅提高,這主要歸功于強大的載體設計和宿主細胞工程方法。但是,還需要對培養基開發領域進行探索和試驗,以及對它們如何影響過程和產品的理解。合理設計將有助于我們了解細胞代謝組學及其調節作用,以開發具有所需產品濃度和治療活性的重組蛋白產品。
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